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基于定性PCR法的轉(zhuǎn)基因食品分析步驟實(shí)例如圖1所示。粉碎樣品后，使用提取套件等提取DNA。使用生命科學(xué)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)BioSpec-nano測(cè)出提取DNA的DNA濃度，將所定量的提取DNA作為模板進(jìn)行PCR。

使用微芯片電泳裝置MCE-202“MultiNA”進(jìn)行PCR產(chǎn)物的電泳分析，確認(rèn)有無(wú)對(duì)應(yīng)目標(biāo)基因序列的PCR產(chǎn)物。

定性PCR法的分析靈敏度非常高，因此，可以檢測(cè)到提取DNA中含有的微量轉(zhuǎn)基因。分別生產(chǎn)流通管理中對(duì)于非轉(zhuǎn)基因體的轉(zhuǎn)基因體混入率的容許值為5％，但即使混入率在5％以下也常常使用定性PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因。以定性PCR進(jìn)行轉(zhuǎn)基因檢測(cè)時(shí)，進(jìn)一步使用定量PCR法求出混入率。定量PCR法將從樣品提取的DNA作為模板，使用用于檢測(cè)轉(zhuǎn)基因以及內(nèi)在性基因的引物實(shí)施PCR。

基于定量PCR擴(kuò)增曲線(xiàn)的解析，求出提取DNA所含轉(zhuǎn)基因以及內(nèi)在性基因的數(shù)目（復(fù)制數(shù)）。式1、式2分別定義混入率（％）、內(nèi)標(biāo)比。表示其實(shí)施了分別生產(chǎn)流通管理的「分離非轉(zhuǎn)基因的」或「非轉(zhuǎn)基因」的食品，但其轉(zhuǎn)基因體混入率超過(guò)5％時(shí)，需要審查分別生產(chǎn)流通管理的內(nèi)容。并且，加工食品中，轉(zhuǎn)基因與內(nèi)在性基因的分解率不一定一致，因此不能準(zhǔn)確求出混入率。

混入率（％）=｛（轉(zhuǎn)基因的復(fù)制數(shù)） / （內(nèi)在性基因的復(fù)制數(shù)）｝×（1 / 內(nèi)標(biāo)比）×100   （式1）
內(nèi)標(biāo)比 =（純粹的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物中的轉(zhuǎn)基因數(shù)） / （純粹的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物中的內(nèi)在性基因數(shù)）   （式2）
 

［參考資料］
農(nóng)林水產(chǎn)消費(fèi)安全技術(shù)中心,JAS分析試驗(yàn)手冊(cè)「轉(zhuǎn)基因食品檢查·分析手冊(cè)」,
http://www.famic.go.jp/technical_information/jashandbook/index.html